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WB会这样做吗?这表明角色非常糟糕吗?
日期:2019-04-19
跟随
大虫子,你好。
我做了WB,我去了5个车道。实验结果如图所示。内标蛋白H3(组蛋白H3,14kDa)和靶蛋白(两条带,42kDa和38kDa)和蓝色标记(第一图像是内标)。第二个图像是目标蛋白质。
在使用胶水后不使用染料,我直接用WB来达到这个效果。
你能解释一下为什么会这样吗?
标记是好的,它表明它不是胶水的问题。
蛋白质的量是150微克(电荷量不能低,如果它低,我的目标带不会清楚)。
而我的WB靶蛋白后来出来了,但它有点模糊和染色。
所以我认为很可能是蛋白质问题。
我们不想加载太多,因此我们计划使用10微量蛋白质溶液和10微米2x SDS电荷,因为总体积约为20微升,但最终蛋白质量将为150微克我保证。如果体积大于10微米,或甚至16微米,则剩余体积为20微升,使用2×SDS缓冲液,并且蛋白质在加载前的沸腾过程中不会溶解或完全溶解。什么会导致这样的结果?
提取植物的全部蛋白质,然后以非常活跃的方式溶解,那么它对蛋白质有什么影响?
感谢经验丰富的蠕虫,如果您有任何问题或其他可能导致此类结果的原因,请提供您宝贵的建议和意见,谢谢!
内参照蛋白H3。
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